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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
人正常肝細胞傳代1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代,一般2天換一次液;
2.待細胞長滿瓶底面積80%,需要對其進行傳代,傳代比例為1:2到1:3;
3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于室溫預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶,置于室溫孵育消化(*次消化需置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為zui佳消化時間,記錄zui佳消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1000rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。(具體根據(jù)隨貨說明書進行操作)
人正常肝細胞凍存條件:*培養(yǎng)基+FBS+DMSO
(備注:建議使用本公司的培養(yǎng)條件,用4度保存的冷凍液直接重懸細胞,不能預(yù)熱后使用。)
保存條件:液氮存儲
上一產(chǎn)品:KYSE150人食道癌細胞
下一產(chǎn)品:LOVO人結(jié)腸癌細胞
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